適于基因組測(cè)序的高質(zhì)量桃線粒體DNA的高效提取方法
摘要：高質(zhì)量線粒體DNA(mtDNA)是線粒體基因組測(cè)序及序列分析的重要前提。為獲得高質(zhì)量桃mtDNA,以‘21世紀(jì)’桃葉片為外植體,24℃完全避光條件下進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)及增殖。對(duì)獲得的愈傷組織進(jìn)行勻漿化處理,結(jié)合差速離心、蔗糖襯墊和SDS裂解等方法提取并純化線粒體。結(jié)果表明:MS培養(yǎng)基添加3.0 mg·L-1 6-BA和1.0 mg·L-1 2,4-D可高效誘導(dǎo)并增殖桃葉片愈傷組織,誘導(dǎo)率可達(dá)到100%。熒光顯微鏡檢測(cè)顯示純化后的線粒體完整且具有活性。提取mtDNA的產(chǎn)率為13.10μg·g-1,無(wú)RNA和蛋白質(zhì)等其它雜質(zhì)污染。mtDNA電泳檢測(cè)條帶大小約為23 kb,無(wú)降解。特異性基因PCR檢測(cè)表明獲得的mtDNA不存在核DNA和葉綠體DNA污染,其純度可滿足后續(xù)分子生物學(xué)試驗(yàn)及高通量基因組測(cè)序的要求。該研究建立了一個(gè)適合桃mtDNA快速高效提取方法,為后續(xù)相關(guān)分子生物學(xué)研究提供了參考依據(jù)。
注：因版權(quán)方要求，不能公開全文，如需全文，請(qǐng)咨詢雜志社。
北方園藝雜志
北方園藝雜志， 半月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：農(nóng)業(yè)信息技術(shù)、研究論文、研究簡(jiǎn)報(bào)、設(shè)施園藝、園林花卉、信息廣角、資源·環(huán)境·生態(tài)、中草藥、食用菌、專題綜述、農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)、實(shí)用技術(shù)、新品種等。于1977年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
- 北大期刊
- 統(tǒng)計(jì)源期刊
- 1-3個(gè)月審核
