摘要:目的:觀察補(bǔ)骨脂素不同劑量含藥血清對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白表達(dá)的影響,探討補(bǔ)腎中藥防治骨質(zhì)疏松癥的分子生物學(xué)機(jī)制。方法:采用SPF級SD雌性大鼠灌服高、中、低劑量補(bǔ)骨脂素配制對應(yīng)用藥組的含藥血清5 d,取血清后,用各含藥血清(補(bǔ)骨脂素高劑量組、補(bǔ)骨脂素中劑量組、補(bǔ)骨脂素低劑量組)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)6、9、12 d,以大鼠血清組為正常對照組,小牛血清組為空白對照組,成骨轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)液組作為陽性對照組。ELISA法檢測第6、9、12天大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞ALP蛋白含量;ELISA法及qRT-PCR法檢測第9天大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果:各用藥組均能提高大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞ALP蛋白表達(dá),第9天達(dá)到峰值。補(bǔ)骨脂素能夠上調(diào)Shh、Gli1,下調(diào)Ptch1 mRNA及蛋白表達(dá),其中補(bǔ)骨脂素中劑量組最顯著。結(jié)論:補(bǔ)骨脂素含藥血清能夠促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞,其作用機(jī)制可能與Hedgehog信號通路的活性有關(guān)。
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